La cytométrie en flux est une technologie qui est utilisée pour analyser les caractéristiques physiques et chimiques des particules dans un fluide lors de leur passage à travers au moins un laser.
Les composants cellulaires sont marqués par fluorescence et excités par le laser pour émettre de la lumière à différentes longueurs d'onde.
La fluorescence peut ensuite être mesurée pour déterminer la quantité et le type de cellules présentes dans un échantillon.
Jusqu'à milliers de particules par seconde peut être analysée comme ils passent à travers le flux de liquide.
Pour les analyses de cytométrie de flux, une seule donnée multiparamétrique des rendements de cellules en suspension qui correspondent à l'avant diffusion de la lumière (FLS), 90 ° diffusion de la lumière (90LS) et FL1 FLN, qui aide à trier et classer les cellules.
L'analyse est effectuée en utilisant le logiciel dans un ordinateur relié au cytomètre de flux.
Certains des processus impliqués dans l'analyse des données de cytométrie en flux sont décrits ci-dessous:
• Gating - Les données des cytomètres de flux est tracée dans une seule dimension de faire un histogramme. Les données peuvent également être présentées dans deux ou même trois dimensions. Les tracés peuvent ensuite être divisés en régions en fonction de l'intensité de la fluorescence, afin de créer une série d'extractions de sous-ensembles appelés portes. Ces portes peuvent être utilisées en hématologie à des fins diagnostiques ou cliniques.
• Les données sont généralement portées sur des échelles logarithmiques. Depuis il ya un chevauchement dans les spectres d'émission des différents colorants fluorescents, les détecteurs doivent être indemnisés de calcul ainsi que par voie électronique.
• Les données recueillies sont ensuite analysées en utilisant le logiciel dans l'ordinateur connecté qui peut être WinMDI (depricated), FlowJo ou CellQuest Pro, par exemple.
• Après que les données ont été recueillies, le cytomètre de flux n'a plus besoin d'être relié à l'ordinateur et l'analyse peut être effectuée en utilisant un ordinateur séparé.
